我们用的内皮细胞是中国科学院上海细胞库的人脐静脉内皮细胞。首先得把细胞从冻存状态复苏。复苏的时候，第一步，在空细胞培养瓶里加入2毫升含血清的MEM培养基，再加入2毫升纯胎牛血清，放在超净台上备用。第二步，把装有内皮细胞的冻存管从 - 80℃的超低温冰箱里迅速拿出来，放在37℃水浴中快速融化，把细胞液吸到离心管里，用低速离心机以1200转每分钟的速度离心3分钟，分离细胞和冻存液。接着把离心管内上层液体倒掉，用第一步里细胞瓶里的液体把离心管底部的细胞沉淀吹起来，转移到细胞瓶里。第三步把细胞瓶放到二氧化碳恒温培养箱里培养。这样细胞就复苏了，开始进行培养。
细胞培养是个长期过程，培养期间要注意保持细胞培养箱的无菌状态，还要保证箱体内湿度饱和、37℃恒温以及5%的二氧化碳含量。细胞瓶里的培养基每天都要更换。在加新培养基之前，往细胞瓶里加入2毫升无菌PBS，轻轻晃动细胞瓶，这样能把细胞瓶内细胞代谢产物和死细胞洗掉。每天都得用荧光显微镜观察细胞瓶里的细胞生长情况，及时把复苏失败或者染菌死亡的细胞扔掉。